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时间 :2020-03-29

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了解到PKR直接被miR-182靶向之后,作者检测了PKR在破骨细胞分化中的作用是否如假设的一般通过IFN途径发挥作用。作者利用从PKR敲除(Pkr?/?)和WT对照组(Pkr+/+)中分离的BMM作为作为三种破骨细胞培养系统中的破骨细胞前体,由单独的RANKL,RANKL或TNF引发激活这些破骨细胞前体。发现PKR敲除之后破骨细胞数量显著增加。在所有条件下,通过增强的破骨细胞生成、破骨细胞生成转录因子(如NFATc1和Blimp1)的基因表达升高、以及破骨细胞标记物,如Ctsk和Dcstamp的增高来评估PKR缺陷显着增加破骨细胞分化。这些结果表明PKR是破骨细胞生成的新型抑制剂(Fig5a-c)。由于PKR参与I型IFN途径,尤其是作为IFN-β表达的激活剂,作者检测了IFN-β的表达,发现PKR缺陷几乎完全阻断了RANKL对IFN-β的诱导(Fig5d,e)。而阻断内源性IFN-β增强了RANKL诱导的WT细胞培养物中的破骨细胞生成(Fig5f)。最后,作者敲除了Mir182Δm/ΔMBMM中的PKR,并发现敲除后Mir182Δm/ΔM BMMs中抑制的破骨细胞分化显着逆转至与WT细胞相似的水平(Fig5g)。下图,与美国空军C-141相撞的德国空军11-02号图-154手机在线视频软件合集包密码图为RD-180火箭发动机

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